昆蟲桿狀病毒技術(shù)服務采用目宿銀紋夜蛾桿狀病毒(AcNPV)作為表達載體。昆蟲桿狀病毒表達載體是一種輔助性依賴,它僅有質(zhì)粒載體不能表達外源基因,還需野生型桿狀病毒輔助,形成整合有外源基因的重組型桿狀病毒才能完成外源基因的表達的真核DNA表達載體。 由于該系統(tǒng)所需要的周期遠比動物或植物系統(tǒng)短,可以利用昆蟲個體或其培養(yǎng)細胞進行大規(guī)模的表達生產(chǎn),生產(chǎn)的重組蛋白產(chǎn)量高,蛋白翻譯后加工比細菌、酵母生產(chǎn)系統(tǒng)完善,而且由于昆蟲桿狀病毒具有限制性的宿主范圍,只對特定種屬的昆蟲及其細胞進行感染,對人畜等脊椎動物沒有感染能力,因此具有比在哺乳動物及其培養(yǎng)細胞生產(chǎn)系統(tǒng)更為安全等優(yōu)點而成為目前*的真核表達系統(tǒng)之一。
昆蟲桿狀病毒技術(shù)服務的技術(shù)特點:
1.重組蛋白表達水平高(最高可達細胞總蛋白的50%),大多數(shù)為有生物功能的可溶性蛋白;
2.真核表達系統(tǒng),重組蛋白生物學活性高,能同時表達多個外源基因;
3.可進行翻譯后修飾:磷酸化修飾,形成正確折疊的二硫鍵,進行N-和O-型糖基化修飾
4.表達人源化蛋白,昆蟲細胞中糖基化途徑克服人源糖蛋白的問題。
5.大多數(shù)昆蟲細胞系在不加血清培養(yǎng)基中快速生長,得到高滴度病毒和高產(chǎn)量重組蛋白;
6.相對于其他真核表達系統(tǒng)成本較低,硬件設施成本低接近于原核表達,無需CO2培養(yǎng)箱,無需血清培養(yǎng)基;
7.規(guī)模化培養(yǎng)簡單經(jīng)濟,適合自動化生產(chǎn),昆蟲細胞比哺乳動物細胞操作簡單;
8.商業(yè)化的BEVS系統(tǒng)讓病毒重組及蛋白表達變得更簡單。