細(xì)胞培養(yǎng)是生命科學(xué)研究中常用的實(shí)驗(yàn)手段。不像其它常用的實(shí)驗(yàn)方法,細(xì)胞培養(yǎng)是一個(gè)動(dòng)態(tài)的連續(xù)過(guò)程,細(xì)胞通常會(huì)對(duì)操作失誤或污染物有所反應(yīng),這些反應(yīng)往往表現(xiàn)出不正常的細(xì)胞狀態(tài)或培養(yǎng)基外觀。如果受到支原體污染時(shí),細(xì)胞形態(tài)較之無(wú)明顯變化,極易被忽視,往往直到污染非常嚴(yán)重時(shí)才能發(fā)現(xiàn)。受污染的細(xì)胞膜上可能有幾百個(gè)支原體,這些支原體競(jìng)爭(zhēng)營(yíng)養(yǎng)并釋放有毒的代謝產(chǎn)物,嚴(yán)重影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
研究表明,至少二十多種支原體能污染細(xì)胞,其中zui常見(jiàn)的有:口腔支原體(M.orale)、精氨酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)、發(fā)酵支原體(M. fermentans)、人型支原體(M. hominis)、唾液支原體(M.salivarium)、肺支原體(M.pulmonis)和梨支原體(M.pirum)等。培養(yǎng)細(xì)胞的支原體污染率在4%-92%不等,其污染來(lái)源包括工作環(huán)境、操作者本身(一些支原體是人體的正常菌群)、培養(yǎng)基、血清、細(xì)胞交叉污染、實(shí)驗(yàn)器材和用來(lái)制備細(xì)胞的原始組織或器官的污染。
確認(rèn)細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中出現(xiàn)問(wèn)題的潛在原因是一項(xiàng)困難且耗時(shí)的任務(wù),在細(xì)胞培養(yǎng)中,任何突然的變化都應(yīng)該被懷疑,同時(shí)良好的試驗(yàn)規(guī)范和定期檢測(cè)支原體污染也十分必要。支原體檢測(cè)的方法有很多種,如直接培養(yǎng)、DNA熒光染色、ELISA和PCR法等。
支原體是一類能夠自我復(fù)制的zui小的原核生物,可透過(guò)一般過(guò)濾膜且對(duì)抗生素有耐藥性,是原代細(xì)胞和傳代細(xì)胞的常見(jiàn)污染物,嚴(yán)重影響細(xì)胞的生長(zhǎng),形態(tài)和代謝。
Mycoplasma Detection Kit 支原體PCR檢測(cè)試劑盒,能夠快速、準(zhǔn)確地檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)中的支原體污染。試劑盒中的 Primers 是依據(jù)支原體基因組中高度保守的 16SrRNA 編碼域而設(shè)計(jì)的,只需簡(jiǎn)單的 PCR 反應(yīng)就可檢測(cè) M.Arginini, M.Fermentans, M.Hyorhinis, M.Orale, M.Salivarium, M. Hominis, M.Pneumonia 等常見(jiàn)的支原體。
全套檢測(cè)試劑
-支原體PCR檢測(cè)試劑盒中包含支原體檢測(cè)的全套試劑,方便使用
操作方法簡(jiǎn)便
-只需簡(jiǎn)單 PCR 就可以檢測(cè)常見(jiàn)的7大類支原體
樣本容易制備
-細(xì)胞培養(yǎng)上清液即可作為 PCR 反應(yīng)模板
結(jié)果分析直觀
-通過(guò)常規(guī)電泳就可以分析細(xì)胞是否被支原體污染
?支原體檢測(cè)流程
?結(jié)果分析
?產(chǎn)品列表